在正常細胞中,細胞周期的每個階段都受到嚴格調(diào)控。在腫瘤細胞中,許多影響細胞周期進程的基因/蛋白發(fā)生突變或過表達 —— 它們成為了癌基因。這些基因/蛋白注定了正常細胞與腫瘤細胞的 「 向左走,向右走 」。
參與細胞周期調(diào)控的蛋白/分子,特別是 DNA 復(fù)制和 DNA 損傷修復(fù),也因此一直受到腫瘤研究人員的極大關(guān)注。
細胞周期調(diào)控檢查點主要包括 G1/S、intra-S 和 G2/M 期。一個細胞只有在存在刺激信號且沒有 DNA 損傷的情況下才能通過這些檢查點。細胞周期檢查點由腫瘤抑制因子和細胞周期蛋白依賴性激酶(cdks)控制。Cdks 與其調(diào)控亞單位(細胞周期蛋白)協(xié)同作用,通過四個階段控制細胞周期進程:G1、S、G2 和有絲分裂(M)。Cdks 為組成性表達,由幾種激酶和磷酸酶調(diào)節(jié),包括 Wee1 激酶和 Cdc25 磷酸酶。
在細胞周期的特定點,DNA 損傷被檢測和修復(fù)。該過程由 DNA 損傷感應(yīng)子 ATM 和 ATR 激酶啟動。檢查點激酶 Chk1 和 Chk2 啟動信號級聯(lián)反應(yīng),激活 G1 和 G2 中的 DNA 損傷檢查點。紡錘體組裝檢查點(SAC)可延遲有絲分裂后期,直至所有染色體在紡錘體上正確對齊,防止出現(xiàn)非整倍體。包括極光激酶 B(Aur B)、PLK1 和 Mps1 在內(nèi)的激酶與細胞周期中的不同控制點有關(guān)。
DNA 復(fù)制分 5 個階段,發(fā)生在 S 期:起始、解旋、引物合成、延伸和終止。解旋酶可 「 解開 」DNA 雙螺旋,端粒酶可減少由此產(chǎn)生的扭轉(zhuǎn)張力,之后暴露單鏈 DNA,啟動復(fù)制叉。DNA 的前導(dǎo)鏈由 Polε 合成,滯后鏈由 Polδ 合成。PCNA 是 DNA 聚合酶 δ 和 ε 的輔因子,作為 DNA 鉗發(fā)揮作用,在 DNA 合成和修復(fù)中都很重要。在終止階段結(jié)束時,DNA 連接酶形成磷酸二酯鍵,將 DNA 鏈連接在一起,形成新的雙鏈 DNA。
在靶向腫瘤細胞的藥物開發(fā)中,可通過靶向關(guān)鍵的 DNA 復(fù)制檢查點和復(fù)制機制,以及耗盡核苷酸來增強復(fù)制應(yīng)激,導(dǎo)致復(fù)制叉停止和塌陷,從而導(dǎo)致腫瘤細胞的有絲分裂災(zāi)變和細胞死亡。
靶向腫瘤細胞周期/DNA 損傷修復(fù)的小分子一覽表